完美体育平台

使用目的：
本试剂盒用于测定鱼血清、血浆及相关液体样本中 5-吡咯啉（P5CRs）含量。
实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中鱼 5-吡咯啉（P5CRs）（P5CRs）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中（P5CRs），再与 HRP标记的  5-吡咯啉          （P5CRs）。用纯化的鱼 5-吡咯啉依次加入 5-吡咯啉抗体，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过*洗涤后加底物  TMB 显色。TMB  在HRP  酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的5-吡咯啉          （P5CRs）呈正相关。用酶标仪在 450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中鱼 5-吡咯啉（P5CRs）浓度。
鱼5-吡咯啉酶联免疫分析试剂盒操作步骤
.  标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
2.  加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样 50μl，待测样品孔中先加样品稀释液 40μl，然后再加待测样品 0μl（样品zui终稀释度为 5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3.温育：用封板膜封板后置 37℃温育30分钟。
4.配液：将 30倍浓缩洗涤液用蒸馏水  30倍稀释后备用
5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置 30秒后弃去，如此重复 5次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶标试剂 50μl，空白孔除外。
7.温育：操作同 3。
8.洗涤：操作同 5。
9.显色：每孔先加入显色剂 A50μl，再加入显色剂 B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色5分钟.
0.终止：每孔加终止液    50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
.测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD 值）。测定应在加终止液后 5分钟以内进行。
注意事项
．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡 5-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。
2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间控制在 5分钟内，如标本数量多，使用排枪加样。
4．请每次测定的同时做标准曲线，做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本  OD值大于标准品孔*孔的 OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请zui后乘以总稀释倍数（×n×5）。
5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6．底物请避光保存。
7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9．本试剂不同批号组分不得混用。
0.如与英文说明书有异，以英文说明书为准。
保存条件及有效期
．试剂盒保存：；2-8℃。
2．有效期：6个月