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人缺血修饰性白蛋白(IMA)ELISA试剂盒检测说明书
发布时间:2022-11-15      点击次数:303

本试剂仅供研究使用  标本:血清或血浆

试验原理:
是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知IMA浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将IMA和标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中IMA的浓度呈比例关系。

试剂盒内容及其配制
成份(2-8℃保存) 96孔配置 48孔配置 配制
96/48人份酶标板 块板(96T) 半块板(48T) 即用型
塑料膜板盖 块 半块 即用型
标准品:80ng/ml 瓶(0.6ml) 瓶(0.3ml) 按说明书进行稀稀
空白对照 瓶(.0ml) 瓶(0.5ml) 即用型
标准品稀释缓冲液 瓶(5ml) 瓶(2.5ml) 即用型
标记的抗IMA抗体 瓶(6ml) 瓶(3.0ml) 即用型
亲和链酶素-HRP 瓶(0ml) 瓶(5.0ml) 即用型
洗涤缓冲液 瓶(20ml) 瓶(0ml) 按说明书进行稀释
底物A 瓶(6.0ml) 瓶(3.0ml) 即用型
底物B 瓶(6.0ml) 瓶(3.0ml) 即用型
终止液 瓶(6.0ml) 瓶(3.0ml) 即用型

自备材料
. 蒸馏水。
2. 加样器:5ul、0ul、50ul、00ul、200、500ul、000ul。
3. 振荡器及磁力搅拌器等。

安全性
. 避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。
2. 实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
3. 不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。

操作注意事项
. 试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
2. 实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
3. 不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
4. 使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。
5. 使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
6. 洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
7. 底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
8. 加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
9. 按照说明书完美体育平台明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

样品收集、处理及保存方法
、 血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,000×g离心0分钟将血清和红细胞完美体育平台小心地分离。
2、 血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。000×g离心30分钟去除颗粒。
3、 细胞上清液---000×g离心0分钟去除颗粒和聚合物。
4、 保存------如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70 ℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

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