完美体育平台

　　人转化生长因子β（GFβ）试剂盒说明
　　
　　本试剂盒仅供研究使用。
　　
　　检测范围：96T
　　
　　20pg/ml-400pg/ml
　　
　　使用目的：本人转化生长因子GFβ试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中转化生长因子β（GFβ）含量。
　　
　　实验原理
　　
　　本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人转化生长因子β（GFβ）水平。用纯化的人转化生长因子β（GFβ）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入转化生长因子β（GFβ），再与HRP标记的转化生长因子β（GFβ）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过*洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的人转化生长因子GFβ呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人转化生长因子β（GFβ）浓度。
　　
　　试剂盒组成
　　
　　30倍浓缩洗涤液20ml×瓶7终止液6ml×瓶
　　
　　2酶标试剂6ml×瓶8标准品（800pg/ml）0.5ml×瓶
　　
　　3酶标包被板2孔×8条9标准品稀释液.5ml×瓶
　　
　　4样品稀释液6ml×瓶0说明书份
　　
　　5显色剂A液6ml×瓶封板膜2张
　　
　　6显色剂B液6ml×/瓶2密封袋个
　　
　　标本要求
　　
　　．人转化生长因子GFβ标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融
　　
　　2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
　　
　　操作步骤
　　
　　.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
　　
　　400pg/ml5号标准品50μl的原倍标准品加入50μl标准品稀释液
　　
　　200pg/ml4号标准品50μl的5号标准品加入50μl标准品稀释液
　　
　　00pg/ml3号标准品50μl的4号标准品加入50μl标准品稀释液
　　
　　50pg/ml2号标准品50μl的3号标准品加入50μl标准品稀释液
　　
　　25pg/ml号标准品50μl的2号标准品加入50μl标准品稀释液
　　
　　2.加样：人转化生长因子GFβ分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品0μl（样品zui终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
　　
　　3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
　　
　　4.配液：将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用
　　
　　5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
　　
　　6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
　　
　　7.温育：操作同3。
　　
　　8.洗涤：操作同5。
　　
　　9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色5分钟.
　　
　　0.终止：人转化生长因子GFβ每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
　　
　　.测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液后5分钟以内进行。
　　
　　操作程序总结：
　　
　　计算
　　
　　以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归完美体育平台式，将样品的OD值代入完美体育平台式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。
　　
　　注意事项
　　
　　．人转化生长因子GFβ试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡5-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。
　　
　　2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
　　
　　3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间控制在5分钟内，如标本数量多，使用排枪加样。
　　
　　4．请每次测定的同时做标准曲线，做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔*孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请zui后乘以总稀释倍数（×n×5）。
　　
　　5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
　　
　　6．底物请避光保存。
　　
　　7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
　　
　　8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
　　
　　9．本试剂不同批号组分不得混用。
　　
　　0.如与英文说明书有异，以英文说明书为准。
　　
　　保存条件及有效期
　　
　　．试剂盒保存：；2-8℃。
　　
　　2．有效期：6个月