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自备材料：
. 蒸馏水。
2. 加样器：5ul、0ul、50ul、00ul、200ul、500ul、000ul。
3. 振荡器及磁力搅拌器等。

试剂的准备：
. 标准品：标准品的系列稀释应在实验时准备，不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。稀释比例按下表中进行：
500pg/ml （6号标准品） 原倍浓度不用稀释直接加入50ul 
250pg/ml （5号标准品） 00ul的原倍标准品加入00ul的标准品稀释液 
25pg/ml （4号标准品） 00ul的5号标准品加入00ul的标准品稀释液 
62.5pg/ml （3号标准品） 00ul的4号标准品加入00ul的标准品稀释液 
3.2pg/ml （2号标准品） 00ul的3号标准品加入00ul的标准品稀释液 
5.6pg/ml （号标准品） 00ul的2号标准品加入00ul的标准品稀释液 
0pg/ml （空白对照） 原倍浓度不用稀释直接加入50ul
2. 洗涤缓冲液（50×）的稀释：蒸馏水50倍稀释。

操作步骤：
.使用前，将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。
2.根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。
3.加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的标记的抗体。盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育45分钟。
4.甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作4次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。
5.每孔加入00ul的亲和链酶素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温育30分钟。
6.甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作4次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。
7.每孔加入底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温育5分钟。避免光照。
8.取出酶标板，完美体育平台加入50ul终止液，加入终止液后应立即测定结果。

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