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产品名称：原代阴道上皮细胞
货号GY-L5122
产品规格: >5X 10细胞数
包装规格: 1ml 冻存细胞悬液或T-25培养瓶
细胞详述: 阴道位于膀胱、尿道与直肠之间，是一个富有弹性的管状器官，再人类的生
殖过程中有多种生理功能。
阴道壁由外到内分为三层:粘膜层，肌层与外膜，其中阴道粘膜为最外层。
阴道上皮呈粉红色，表面为复层鳞状上皮，但无角化层。
细胞特性:
1)细胞来源于人正常阴道组织。
2)细胞鉴定: 细胞角蛋白(PCK) 免疫荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有HIV-1、HBV、 HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
5)细胞生长方式:上皮样， 多角形细胞，贴壁培养。
培养操作：
原代阴道上皮细胞1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中完美体育平台摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，完美体育平台拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类；
1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。
2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞，根据细胞数量加 入血 清和 DMSO，轻轻混匀，DMSO 终浓度为 10%，细胞密度不低于1x106/ml，每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液，注意冻 存管做好标识。
3. 将冻存管置于程序降温盒中，放入-80 度冰箱，2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
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