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使用方法:
一、样品 RNA 的制备
、用自选方法抽提病毒样品 RNA。注意:可以选用完美体育平台生产的一管式病毒 RNAout
2、或柱式病毒 RNAout。
二:RT(逆转录)反应合成 cDNA
. 按下表配制 RT 反应体系(20 μL 体系)
2. 70℃保温 5 分钟变性模板后立即冰浴。
3. 严格按顺序加入 6μL RT Buffer(含 dNTP)和 2μL MMLV 逆转录酶(含 RI),
反应终体积为 20μL。
4. 42℃保温 60 分钟。此步为 RT 反应。
5. 70℃保温 0 分钟以终止反应,然后放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以直接作为 PCR 模板使用,丌需要纯化。产品名称:猫瘟病毒(FPV)核酸检测试剂盒品牌
规格:48T/盒
类别:荧光-PCR法
运输:低温、避光、快递免费送货上门。
用途:生化实验,合成实验等试验。
运输及保存:低温运输,-20℃保存, 保存期限为 6 个月。
自备试剂:样品 RNA。
性能指标:点击了解更多。
.试剂盒检测特异性为00%
2. 检测试剂盒重现性为00%
3. 灵敏度可达到03/ml
4. 有效期为6个月
注意事项:
①加入试剂的顺序应*,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照鸡血红蛋白(HB)ELISA检测试剂盒说明书完美体育平台明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 5-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至0kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.~umol或0~00pmol,以低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。Fmoc-2-氨基异丁 瓶 Chang liver 低温运输和保存
2-苯基吲哚 瓶 CHL 低温运输和保存
吉西他滨 瓶 CHO-K 低温运输和保存
苯并噻吩 瓶 CHO 低温运输和保存
5-硝基水杨 瓶 CL87/CCL87 低温运输和保存
3,4,5-*氧苯乙 瓶 CNE-2Z 低温运输和保存
[,'-双(二苯基膦)二茂铁]二钯二氯甲烷络合物 瓶 CNE 低温运输和保存
2-氟甲苯 瓶 COC 低温运输和保存
2,3-二基酚 瓶 COLO205 低温运输和保存
BOC-D-丝氨酯 瓶 COLO320/DM 低温运输和保存
2,5-二羟基甲苯 瓶 COS- [COS] 低温运输和保存
3,4-二氯甲苯 瓶 COS-7 [COS7] 低温运输和保存
2,5-二基胺 瓶 COS-7 SV40 低温运输和保存
红色KB/5-氯-2-基胺 瓶 CRFK 低温运输和保存
2-氯-5-基胺 瓶 CRT 低温运输和保存
猫瘟病毒(FPV)核酸检测试剂盒品牌Mouse pituitary adenylate cyclase activating polypeptide,PACAP 小鼠垂体腺苷环化酶激活肽 进口/国产常温,避光 规格:00mg
lymphocyte factor 人淋巴细胞因子 进口/国产常温,避光 规格:00mg
TGF Beta2 (Rabbit transforming growth factor Beta2) 兔转化生长因子β2 进口/国产常温,避光 规格:00mg
NOS (Rabbit nitric oxide synthase) 兔一氧化氮合成酶 进口/国产常温,避光 规格:00mg
Plant Vitamin A,VA 植物 进口/国产常温,避光 规格:00mg
Mouse Angiotensin converting enzyme,ACE 小鼠血管紧张素转化酶 进口/国产常温,避光 规格:00mg
TARC/CCL7(thymus activation regulated chemokine) 人胸腺活化调节趋化因子 进口/国产常温,避光 规格:00mg
PGR 大鼠孕酮受体 进口/国产常温,避光 规格:00mg
Mouse angiotension II ,ANG- II 小鼠血管紧张素Ⅱ 进口/国产常温,避光 规格:00mg
Plant Vitamin E,VE E 植物 进口/国产常温,避光 规格:00mg
eNOS (Rabbit Endothelial nitric oxide synthase) 兔内皮型一氧化氮合成酶 进口/国产2-8℃,避光 规格:300mg
NCAM-L/CD7(Neural cell adhesion molecule ligand ) 人神经细胞粘附分子配体 进口/国产常温,避光 规格:00mg
ACE II 大鼠血管紧张素Ⅱ转化酶 进口/国产常温,避光 规格:00mg
ACE I 大鼠血管紧张素Ⅰ转化酶 进口/国产常温,避光 规格:00mg
PLAUR/uPAR (Rabbit Urokinase-type Plasminogen Activator Receptor) 兔型纤溶酶原激活物受体 进口/国产常温,避光 规格:50mg
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